蛋白超濾管millipore現(xiàn)貨-濃縮脫鹽濾器

    在蛋白質(zhì)組學、分子生物學及生物制藥工藝開發(fā)中，樣品濃縮、脫鹽與緩沖液置換是貫穿實驗流程的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。面對珍貴且微量的蛋白樣品，或需要快速處理的組織培養(yǎng)上清，超濾裝置的選擇直接決定了樣品的回收率與實驗的推進效率。蛋白超濾管AmiconUltra全系列作為MerckMillipore旗下的離心式超濾裝置，憑借Ultracel®再生纖維素膜的低蛋白吸附特性與垂直膜結(jié)構(gòu)的高效設(shè)計，為科研人員提供了從微量珍貴樣本到中等體積培養(yǎng)物的完整處理方案。該系列提供0.5mL、4mL和15mL三種上樣體積規(guī)格，并配備3kDa、10kDa、30kDa、50kDa、100kDa五種截留分子量選項，全面適配抗原、抗體、酶、病毒及核酸等各類生物樣品的濃縮、脫鹽與緩沖液更換需求。

    選擇蛋白超濾管AmiconUltra，意味著為您的樣品前處理流程選擇了一份經(jīng)過全球?qū)嶒炇因炞C、兼具高回收率（通常>90%）與操作便捷性的標準化工具。

一、全規(guī)格參數(shù)體系：精準匹配多樣化的樣品體積需求

    蛋白超濾管AmiconUltra提供三種上樣體積規(guī)格，全面覆蓋從微量珍貴樣品到常規(guī)體積樣品的各種應用場景：

    對比維度0.5mL規(guī)格4mL規(guī)格15mL規(guī)格

    最大起始處理量0.5mL4mL15mL（吊籃）/12mL（角轉(zhuǎn)）

    典型濃縮終體積15–20μL50–100μL150–300μL

    有效膜面積1cm23cm27.6cm2

    適配轉(zhuǎn)子1.5mL離心機轉(zhuǎn)子15mL離心機轉(zhuǎn)子50mL離心機轉(zhuǎn)子

    最大離心力14,000×g吊籃4,000×g；角轉(zhuǎn)7,500×g吊籃4,000×g；角轉(zhuǎn)5,000×g

    濃縮倍數(shù)80–100倍80–100倍80–100倍

    反轉(zhuǎn)回收模式是（1,000×g）否（移液槍直接回收）否（移液槍直接回收）

    數(shù)據(jù)來源：

    0.5mL規(guī)格：微量珍貴樣本的理想選擇

    0.5mL蛋白超濾管AmiconUltra專為微量珍貴樣本的濃縮與純化而設(shè)計。其最大起始樣品處理量為0.5mL，典型濃縮后終體積僅為15–20μL，滯留體積小于1μL。該規(guī)格配備兩個外管，專門支持反轉(zhuǎn)離心回收操作——濃縮完成后將內(nèi)管倒置于新收集管中，以1,000×g離心2分鐘，即可將濃縮后的樣品從超濾內(nèi)管高效轉(zhuǎn)移至收集管中，最大限度減少珍貴樣品的損失。濃縮倍數(shù)可達80–100倍，整個離心操作約需10–30分鐘。

    4mL規(guī)格：常規(guī)實驗室的通用配置

    4mL蛋白超濾管是常規(guī)細胞培養(yǎng)和蛋白質(zhì)純化實驗室的常用規(guī)格。其最大起始樣品處理量為4mL，典型濃縮后終體積為50–100μL，有效膜面積約3cm2。該規(guī)格適配15mL離心機轉(zhuǎn)子，濃縮后的樣品可通過移液槍直接吸取回收，操作簡便快捷。

    在ELISA樣品前處理或抗體純化中的洗脫液濃縮等流程中，4mL規(guī)格可同時兼顧通量和回收率。

    15mL規(guī)格：中等通量的主力配置

    15mL蛋白超濾管是Amicon®Ultra系列中容積較大的規(guī)格，起始樣品處理量達15mL（使用吊籃轉(zhuǎn)子），典型濃縮后終體積為150–300μL，有效膜面積7.6cm2。該規(guī)格適用于組織培養(yǎng)上清、層析洗脫液等較大體積樣本的高效處理。當需要從10–15mL雜交瘤細胞上清中濃縮單克隆抗體時，單根15mL超濾管即可完成。

二、五種截留分子量：精準匹配目標分子的核心選型原則

    每種體積規(guī)格的蛋白超濾管均提供3kDa、10kDa、30kDa、50kDa和100kDa五種截留分子量選項。

    選型核心原則：

    蛋白樣本：建議選擇的超濾管截留分子量為目標蛋白的1/2或者1/3

    核酸樣本：137–1159bp雙鏈DNA推薦30kDa，回收率>90%

    病毒濃縮：慢病毒推薦100kDa；腺病毒推薦50kDa

    納米顆粒：粒徑<3nm選擇3kDa；>10nm選擇100kDa

三、核心應用場景

    蛋白超濾管AmiconUltra的應用范圍已超越常規(guī)生物樣品處理，覆蓋了蛋白質(zhì)科學、病毒學、材料科學等多個前沿領(lǐng)域。

    3.1蛋白質(zhì)與抗體濃縮

    該系列產(chǎn)品廣泛應用于含抗原、抗體、酶、核酸或微生物的生物樣品的濃縮。典型蛋白回收率數(shù)據(jù)如下：

    截留分子量測試蛋白分子量回收率

    3kDa細胞色素c12,400Da98.7%

    10kDa細胞色素c12,400Da95%

    30kDaBSA67,000Da95%

    50kDaBSA67,000Da94%

    100kDaIgG156,000Da91%

    案例：抗體濃縮：使用Amicon®Ultra-1530kDaMWCO裝置濃縮IgG，在吊桶式轉(zhuǎn)子中4,000×g離心10–20分鐘，或在固定角轉(zhuǎn)子中5,000×g離心10–20分鐘即可完成。經(jīng)過幾輪滲濾即可有效去除未摻入的標記物，制備得到純凈的抗體。

    3.2病毒濃縮

    慢病毒：推薦100kDaMWCO

    腺病毒：推薦50kDaMWCO

    具體操作可參考病毒濃縮純化試劑盒FTLV00003和FTAV00003

    3.3核酸濃縮與純化

    在DNA或RNA濃縮、PCR產(chǎn)物純化等應用中，AmiconUltra30kDaMWCO產(chǎn)品在137bp到1159bp雙鏈DNA的濃縮效果上已得到驗證，回收率>90%。

    3.4外泌體與納米顆粒

    外泌小體的直徑在30–100nm左右，可使用蛋白超濾管進行純化與濃縮。眾多客戶已將該系列超濾管用于納米顆粒的濃縮及純化，并獲得良好結(jié)果。納米顆粒對應的截留分子量選擇參考：

    納米顆粒粒徑推薦截留分子量

    1.5<粒徑<3nm3kDa

    3<粒徑<5nm10kDa

    5<粒徑<7nm30kDa

    7<粒徑<10nm50kDa

    10nm<粒徑100kDa

    3.5脫鹽與緩沖液置換

    通過離心濃縮與稀釋再濃縮的循環(huán)操作，可輕松實現(xiàn)蛋白質(zhì)溶液的脫鹽或緩沖液更換。此過程溫和快速，避免了傳統(tǒng)透析方法的耗時問題。

四、使用與操作指南

    4.1標準操作流程

    預潤濕處理：新購超濾管為干燥狀態(tài)，使用前建議加入超純水進行預潤濕。水量需覆蓋濾膜表面。濾膜一旦潤濕后應避免變干。

    平衡與離心操作：確保樣品管在離心機中對稱放置。離心力請參照上表各規(guī)格推薦值。離心前建議將離心機預冷至4℃（對溫度敏感樣本尤為重要）。整個離心操作通常約需10–30分鐘。注意：Amicon®Ultra都是采用熱封設(shè)計，不可以用高壓高溫滅菌。

    反轉(zhuǎn)離心回收：對于0.5mL規(guī)格的超濾管，濃縮完成后建議采用反轉(zhuǎn)離心回收模式以提升回收率——將內(nèi)管倒過來插入干凈的微量離心管中，以1,000×g離心約2分鐘。

    4.2離心參數(shù)參考

    不同規(guī)格的蛋白超濾管離心參數(shù)如下：

    規(guī)格濃縮離心力反轉(zhuǎn)回收離心力

    0.5mL14,000×g1,000×g

    4mL吊籃4,000×g；角轉(zhuǎn)7,500×g移液槍直接回收

    15mL吊籃4,000×g；角轉(zhuǎn)5,000×g移液槍直接回收

五、常見問題解答（FAQ）

    Q1：AmiconUltra超濾管的膜材質(zhì)是什么？

    A：Amicon®Ultra超濾管的膜材質(zhì)為默克密理博的Ultracel®再生纖維素膜，生產(chǎn)工藝嚴格，截留分子量明確而精準，蛋白吸附損失最小。

    Q2：超濾管可以重復使用嗎？

    A：所有的離心超濾管都是一次性的，不推薦重復使用。

    Q3：超濾管可耐受的pH值范圍是多少？

    A：對于再生纖維素膜，說明書中所推薦的pH范圍為3–13。具體酸堿類型及濃度請參考說明書中的化學兼容性表。

    Q4：超濾管是否可以高壓滅菌？

    A：不可以。Amicon®Ultra都是采用熱封設(shè)計，不可以用高壓高溫滅菌?？梢允褂?0%乙醇進行處理。

    Q5：蛋白在濃縮時出現(xiàn)了沉淀，如何改進？

    A：蛋白如果濃縮過快或者過度濃縮都有可能引起蛋白沉淀。建議的改進方法：

    離心力降為推薦離心力的30%–50%

    改用截留分子量更大的超濾管（如原本選用10kDa，此時可選擇30kDa）

    在濃縮過程中取出超濾管，用槍頭反復吹吸幾次后再繼續(xù)濃縮

    建議蛋白濃縮后的最終濃度不超過20mg/mL

    Q6：有時候用超濾離心管連水都離不下來，可能是什么原因？

    A：Amicon®Ultra超濾膜中含有微量甘油。請先用0.1NNaOH清洗再離心，最后用緩沖液或Milli-Q®水再次清洗后甩干。清洗后的濾膜應立即使用，如暫時不用，請保持潤濕狀態(tài)。

    Q7：如果要用超濾的方法分離兩種蛋白，這兩個蛋白的大小需要相差多少？

    A：按照經(jīng)驗，推薦兩個蛋白的分子量要相差一個數(shù)量級（10倍）。

    Q8：是否可以在4℃進行離心？

    A：可以，但是低溫會增加蛋白樣品的粘性，導致流速減慢，建議可將離心時間延長到原來的1.5倍。

    Q9：超濾管是否不含RNA酶？

    A：不保證。建議用0.1%DEPC在37℃浸泡2小時，以滅活RNA酶；殘留的DEPC可以用Milli-Q®超純水洗滌除去。

    蛋白超濾管AmiconUltra憑借其0.5mL、4mL和15mL三種靈活規(guī)格選擇、3kDa至100kDa的五種截留分子量選項以及Ultracel®再生纖維素膜的高回收率特性（通常>90%），成為生物樣品濃縮、脫鹽和緩沖液置換的可靠工具。0.5mL規(guī)格以反轉(zhuǎn)回收模式適配珍貴微量樣本的高效處理，4mL與15mL規(guī)格以適中的通量覆蓋常規(guī)實驗需求。根據(jù)您的樣本體積、目標分子大小及實驗目的選擇合適的規(guī)格與截留分子量組合，遵循“預潤濕防干裂、對稱平衡防損傷"的操作原則，將有助于樣本回收率，提升實驗室工作的整體效率與數(shù)據(jù)可靠性。

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